如何确定蛋白质等电点

 
如何确定蛋白质等电点

鉴于蛋白质表面离子化侧链的存在,导致蛋白质具有净电荷。每一种蛋白质都存在一个特定的pH值,使其表面净电荷为零,即所谓的等电点。在等电点时,蛋白质以两性离子形式存在,其净电荷为零(即正负电荷相等)。此时,蛋白质分子在溶液中不会因为相同电荷的相互排斥而聚集在一起,蛋白质分子之间的相互作用力减弱。因此,在这种情况下,蛋白质颗粒更容易发生碰撞和凝聚,从而形成沉淀物。因此,蛋白质在等电点时溶解度最小,最容易生成沉淀。此外,等电点还会减小许多物理性质,如黏度、膨胀性和渗透压等,从而有利于悬浮液的过滤。与等电点相反,其他pH值下的蛋白质具有净电荷,可以使用电泳和离子交换层析等技术来分离和纯化蛋白质。等电点沉淀法主要用于蛋白质和两性电解质的分离和提纯,同时也可应用于大豆异黄酮的分离。通过等电点沉淀法去除蛋白质,可以提高异黄酮制品的纯度,异黄酮截留率为7.2%,而蛋白质截留率为91.1%。

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