实验室常用的目的基因获取方法有以下几种:从基因文库中获取、cDNA文库、反转录法和人工合成法。
首先,从基因文库中获取目的基因。目的基因,也被称为靶标基因,是在实验中研究或操作的特定基因。在基因克隆的过程中,目的基因需要被分离、纯化、克隆并转化到生物体中,以实现特定的表型特征,如抗虫或耐除草剂等。通常,科学家们会使用生物学方法或物理化学方法从大肠杆菌等生物体中分离出所需的基因片段。尽管已成功分离出一些纯化的基因,但总体来看还是比较有限。
其次,cDNA文库也是获取目的基因的常用方法。cDNA文库是利用反转录酶将mRNA反转录成cDNA,并将其克隆到载体中的方法。通过利用该文库,可以获得特定基因的cDNA序列,进而进行进一步研究和操作。
此外,反转录法也是一种常见的目的基因获取方法。反转录法利用逆转录酶将mRNA转录为cDNA,并合成相应的DNA链。这种方法可以帮助科学家们获得所需的基因序列,为后续的研究提供基础。
最后,人工合成法是一种能够合成功能性目的基因的方法。早在1970年,科学家们已成功合成了77对碱基的酵母丙氨酸tRNA基因,并在1973年合成了126对碱基的酪氨酸tRNA基因。然而,这些合成的基因并不能得到表达。直到1976年8月,科学家们成功合成了能够表达功能的人工基因,即含有193对碱基的大肠杆菌酪氨酸tRNA基因。从此以后,人工合成基因的报道不断涌现。
综上所述,基因的获取方法有多种途径,包括从基因文库中获取、使用cDNA文库、利用反转录法和人工合成法。这些方法为科学家们研究和操作特定基因提供了有力的工具和手段。